Bitte reduzieren Sie das Thiol vor Verwendung des Oligos in Ihrer Applikation:
1. Geben Sie dazu 200 µl 10mM TCEP (2,9mg TCEP-HCL in 1ml 1xTE Puffer, pH 8.0) auf Ihr Oligo
2. Schütteln Sie es 60 min bei Raumtemperatur
3. Fällen Sie das Oligo:
- Geben Sie 150 µl 3 M Na-Acetate auf die Oligolösung [24,6 g Na-Acetate + 0,21 g Mg-Acetate in 100 ml dest. H2O]
- Füllen Sie das Tube mit Ethanol p.a.
- Schütteln Sie das Tube vorsichtig
- Inkubieren Sie 20 min bei –20°C
4. Zentrifugieren Sie 5 min bei 13000 rpm und verwerfen Sie den Überstand
5. Lassen Sie das Pellet bei Raumtemperatur trocknen
Bitte beachten:
Nach der Behandlung ändert sich das Molekulargewicht der Thiol-Modifikation:
[ThiolC3]: nach der Reduktion: 90,14 (C3H6OS); vorher: 180,28 (C6H12O2S2)
[ThiolC6]: nach der Reduktion: 132,22 (C6H12OS); vorher: 264,44 (C12H24O2S2)